نویسنده : اکرم ثناخوان رضائیه

دانشكده : دانشکده علوم پایه

رشته/گرایش تحصيلي : زیست شناسی - سلولی و مولکولی

استاد راهنما (عضو هیات علمی مرکز) :سیده طوبی شفیقی, ,

چكيده : سابقه و هدف: اشریشیا کلی یکی از شایعترین عوامل ایجاد کننده عفونت‎های ادراری است. برای درمان این عفونت‎ها معمولاً آنتی بیوتیک‎های گروه کوئینولون‎ها به ویژه فلوروکوئینولون‎ها نظیر داروی سیپروفلوکساسین تجویز می‎گردد. بروز مقاومت‎های دارویی در این باکتری بر اساس مکانیسم‎های مختلف از جمله بروز جهش در ژن‎های کد کننده آنزیم DNA ژیراز مشاهده شده است. هدف از مطالعه حاضر بررسی جهش در ژن gyrA در جدایه‎های اشریشیا کلی مقاوم به کوئینولون‎ها است. مواد و روش‎ها: این مطالعه مقطعی از شهریور ماه لغایت دی ماه 1395 انجام شد. پس از جمع آوری 51 نمونه اشریشیا کلی جدا شده از عفونت‎های ادراری از سطح بیمارستان‎های مختلف شهر رشت، با آزمایشات بیوشیمیایی تکمیلی مورد تایید قرار گرفت. پس از تایید هویت باکتری‎ها، بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه‎های E. coli با روش انتشار از دیسک توسط 7 آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین، لووفلوکساسین، آمپی سیلین، آمیکاسین، ایمی‎پنم، سفتازیدیم و جنتامایسین بر اساس پروتکل CLSI انجام گردید. همچنین با روش ماکرودایلوشن میزان مقاومت جدایه‎ها نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین بر اساس استاندارد CLSI تعیین شد. سپس کلیه جدایه‎های مقاوم به سیپروفلوکساسین با روش جوشاندن مورد استخراج DNA قرار گرفت و برای ژن gyrA در شرایط بهینه PCR انجام شد و تعیین توالی گردید. نتایج: از بین 51 جدایه اشریشیا کلی مورد مطالعه، 36 جدایه(6/70 %) با روش انتشار از دیسک مقاوم به سیپروفلوکساسین شناخته شدند. میزان فراوانی جدایه‎های مقاوم به لووفلوکساسین(8/60 %)، آمپی سیلین(9/58 %)، آمیکاسین(6/19 %)، ایمی‎پنم(3/35 %)، سفتازیدیم(3/35 %) و جنتامایسین(3/35 %) بود. نتایج MIC برای آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین، نشان داد که بیشترین مقاومت 1024 میکروگرم بر میلی لیتر و کمترین مقاومت 32 میکروگرم بر میلی لیتر بود. بعد از انجام PCR و الکتروفورز، 25 جدایه تعیین توالی شد و 17 جدایه جهش بد معنی Ser83Lue را نشان دادند که از میان آنها 11 جدایه جهش بد معنی Asp87Asn را نیز همزمان نشان دادند. نتیجه گیری: ﻧﺘﺎﯾﺞ مطالعه حاضر ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ﻣﯿﺰان ﺷﯿﻮع اشریشیا کلی‎های مقاوم به سیپروفلوکساسین در ﻧﻤﻮﻧﻪ‎های ﺑﯿﻤﺎرﺳﺘﺎﻧﯽ ﻗﺎﺑﻞ ﺗﻮﺟﻪ اﺳﺖ و مقاومت در برابر کوئینولون‎ها با جهش در ژن gyrA همراه است و بنابراین به نظر می‎رسد در جدایه‎های اشریشیا کلی بومی‎جهش در ژن gyrA در ایجاد مقاومت به سیپروفلوکساسین نقش موثری داشته باشد. همچنین شیوع بالای اشریشیا کلی‎های مقاوم به سیپروفلوکساسین ﻣﯽ ﺗﻮاﻧﺪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﯾﮏ ﻫﺸﺪار در درﻣﺎن ﻋﻔﻮﻧﺖ ﻫﺎي ﻧﺎﺷﯽ از اﯾﻦ ﺑﺎﮐﺘﺮي در بیماران بستری در بیمارستان‎های سطح رشت ﻣﻄﺮح ﺑﺎﺷﺪ.

تاريخ دفاع : 1395-11-13