نویسنده : ساناز جعفرزاده

دانشكده : دانشکده علوم پایه

رشته/گرایش تحصيلي : زيست فناوري (بيوتكنولوژي) گرايش ميكروبي

استاد راهنما (استاد مدعو) : , دکتر نجمه رنجی,

چكيده : مقدمه : سودوموناس آئروژینوزا یکی از رایج ترین گونه های باکتری گرم منفی مقاوم به آنتی بیوتیک بوده که منجر به عفونت های بیمارستانی میشود. تحقیقات نشان داده است که باکتری سودوموناس آئروژینوزا پتانسیل بیان پمپ های تراوشی چند دارویی تحت عنوان mex را دارد. به نظر میرسد این پمپ ها از مهم‌ترین عوامل مقاومت به آنتی‌بیوتیک ها به شمار می روند. انتقال دهنده mexY با استفاده از نیروی محرکه پروتون داروها رابه محیط خارج منتقل میکند، توسط ژن mexY بیان میشود. کورکومین فرآورده گیاهی با خواص بیولوژیکی متنوع است که از ریشه گیاه زردچوبه (Curcuma longa) بدست می آید. هدف از انجام این آزمایش، بررسی تاثیر کورکومین محبوس شده در نانومیسل، در مهار رشد سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین و بیان ژن mexY می باشد. مواد و روشها : به منظور انجام این تحقیق، نمونه های سودوموناس آئروژینوزا از بیمارستان های مختلف استان گیلان تهیه و براساس روش های افتراقی مانند مولر هینتون و اکسید از تعیین هویت گردید. پس از تعیین MIC، جدایه ها ابتدا با آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین به تنهایی و سپس به صورت ترکیب با کورکومین محبوس شده در نانومیسل تحت تیمار قرار گرفتند.پس از 48 ساعت خواص ضدباکتریایی کورکومین در طول موج 625 نانومتر و توسط OD تعیین گردید. در ادامه با مقایسه MIC و MBC نمونه های تیمار شده با دارو و بدون تیمار، غلظت و مدت زمان لازم برای تیمار مشخص گردید و بعد از تیمار در این شرایط، RNA استخراج شده، سنتز cDNA صورت گرفت و سپس به روش Real-Time PCR بیان ژن mexY نسبت به ژن مرجع به کمک معادلعه 2-∆∆CT بررسی شد. نتایج : نتایج بدست آمده از MIC در این تحقیق نشان داد که، بطور کلی ترکیب آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین با کورکومین محبوس شده در نانومیسل، سبب کاهش معنی دار در تعداد باکتریها پس از گذشت زمان 48 ساعت میشود، بطوریکه قابل شمارش نبودند. همچنین آنالیز نتایج Real-Time PCR نشان داد که بیان ژن mexY در جدایه های تیمار شده با ترکیب سیپروفلوکساسین و کورکومین در مقایسه با جدایه های سیپروفلوکساسین به تنهایی کاهش میابد. بحث : این بررسی نشان داد که کورکومین MIC سیپروفلوکساسین را در باکتری سودوموناس آئروژینوزا از طریق کاهش بیان mex کاهش میدهد. همچنین این گونه پیشنهاد میشود که ترکیب سیپروفلوکساسین و کورکومین میتواند به عنوان یک روش درمانی جدید علیه عفونت های ناشی از سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به آنتی بیوتیک استفاده گردد.

تاريخ دفاع : 1396-6-27